Тирзепатид примеси

Тирзепатид примеси|Контрол на примесите на тилпептид|Персонализиран синтез на примеси и потвърждение на структура|Научен-пептид

Тирзепатид Контрол на примесите - за GLP-1/GIP двойно-целево изследване на качеството на лекарствата, генерично отчитане на лекарства. Наука-Пептидът осигурява персонализиран синтез на свързани с тилпептид примеси, включително делеционни пептиди, окислени примеси, ексфолиращи продукти с мастни киселини, димери и т.н., със структурни данни за потвърждение в подкрепа на вашите Ние можем да поддържаме вашето изследване на спектроскопия на примеси с данни за структурно потвърждение. Добре дошли да се свържете с нас.

Тирзепатид (тирзепатид) е двойният агонист на GLP-1/GIP, който Eli Lilly измисли и той е в разгара си през тези две години. Той има добър ефект за понижаване на захарта и силен ефект за намаляване на теглото и се нарича подобрена версия на "чудотворното лекарство за отслабване". Вътрешните производители на пептидни генерични лекарства, много се взират в него - след изтичане на патента, кой може първо да премине през качеството на изследването, който ще има възможност да грабне първия генеричен.

 

Качеството на тилпептида обаче не е толкова лесно за изследване. Той е по-сложен от симетикона, с 39 аминокиселини, странична верига на мастна киселина (ейкозандиова киселина) и линкер. Примесите, които могат да се появят по време на процеса на синтез, са много по-високи от тези на обикновените пептиди. Липсващи пептиди, окислителни примеси, продукти на отделяне на мастни киселини, димери, примеси, свързани с линкер-, всеки трябва да има контрол, всеки трябва да бъде чист.

 

Натрупахме много опит в синтеза на сложни пептидни примеси. Ние сме специализирани в изследването на тилпептид и знаем какви са трудностите в неговия профил на примеси и кои са съществените контролни елементи. Ние можем да персонализираме синтеза на различни контроли за примеси на тилпептид според вашите нужди, с данни за потвърждение на структурата и да ви помогнем да установите метода, така че да е по-малко вероятно да ви бъде издадено допълнение при подаване.

Молекулярната структура на тилпептида определя, че неговият профил на примеси е много по-сложен от този на общите пептиди. Когато правим проучвания за примеси, ние се фокусираме основно върху следните категории:

Липсващ пептид
39-те аминокиселини, всяка от които е пропусната по време на процеса на синтез, е примес. Времената на задържане на липсващите пептиди при HPLC бяха широко разпространени, с различна полярност на липсващите пептиди в различни позиции. Някои липсват в N-края, някои в средата и някои близо до мястото на свързване на мастната киселина. Получихме поръчка от клиент за 15 липсващи пептида в различни позиции, за да локализираме всички възможни липсващи примеси в техния процес.

Окисляващи примеси
Met в последователността на тилпептид е податлив на окисляване до сулфоксид и след това до сулфон. Окислените примеси често се появяват при проучвания за стабилност и нарастват след определен период от време. Направихме сравнение, при ускорени условия за един месец, пикът на окисление може да нарасне до повече от 0,3%, без контрол.

Продукти за отделяне на мастни киселини
Това е примес, уникален за тилпептида. Неговата странична верига на мастни киселини (ейкозандиова киселина) е прикрепена към лизина чрез линкер и тази модификация може да бъде частично отделена по време на синтез или съхранение, което води до премахване на примеси от мастна киселина-. По-проблематично е, че отделянето може да се случи на различни места - между мастната киселина и линкера, или между линкера и пептида -, което води до различни примеси. Синтезирахме няколко примеса,-свързани с мастни киселини за нашите клиенти, вариращи от пълно отделяне до само малка част.

Димери/полимери
Две или повече тилпептидни молекули се групират заедно, за да образуват димер или по-висок. Молекулното тегло на димера е два пъти по-голямо от това на основния пик и често е широк пик при HPLC, така че трябва да бъде специално отделен и пречистен, преди да може да се използва като контрола. Извършихме подготовката на димери и бяха необходими няколко кръга на пречистване, за да се постигне чистота от повече от 95%.

Примеси,-свързани с линкер
Модификацията на мастна киселина на тилпептида използва линкер (напр. -Glu, PEG и т.н.) и самият този линкер може да предизвика странични реакции по време на синтеза, генерирайки примеси с липсващи или непълни линкери. Този вид примеси не се срещат в обикновените пептиди, но са уникални за тилпептида, който трябва да се проучи специално.

Дезаминирани примеси
Аспарагинът (Asn) и глутаминът (Gln) лесно се дезаминират при киселинни или нагряващи условия, което води до изомери. Има няколко Asn и Gln в последователността на тилпептида и примесът от дезаминиране често се появява в теста за принудително разграждане, така че контролният продукт трябва да се използва за локализиране на примеса.

Диастереоизомери
По време на дълговерижния синтез отделните аминокиселини могат да претърпят рацемизация, което води до диастереоизомери. Съдържанието на този вид примеси обикновено не е високо, но експертите ще попитат при деклариране и е по-добре да имате контролен продукт за потвърждение.

Много от тези примеси не могат да бъдат закупени и трябва да бъдат синтезирани по поръчка. Направихме много проекти за персонализиране на примеси на тилпептид, покриващи всички горепосочени категории.

Изтриването на пептидната серия
We synthesize whatever is missing. For example, the lysine at position 20 is missing, or the amino acid near the fatty acid attachment site is missing. We will synthesize according to your process impurity profile, and the purity is usually >95%, с MS и NMR потвърждение. Синтезирахме набор от пептиди с разстояние от 5 аминокиселини от N-края до C-края.

Окисляващи примеси
Met in Tilpeptide is oxidized to sulfoxide or sulfone, and we can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control product. We can control the oxidation conditions and synthesize the oxidized control. The purity is >95% и можем да предоставим LC-MS спектър, за да потвърдим степента на окисление. Сулфоксидът и сулфонът се разделят чрез HPLC и можем да направим и двете.

Продукти за отделяне на мастни киселини
Това е един от най-трудните примеси за работа в тилпептида. Веригата на мастната киселина може да е напълно изключена или може да е частично изключена (напр. липсват последните няколко въглерода). Можем да синтезираме серия от варианти за различни позиции на веригата. В един от най-сложните проекти, които сме правили, клиентът ни помоли да синтезираме примес с 8 въглерода, липсващи от веригата на мастната киселина, и ни отне два месеца, за да го направим правилно.

Димер
Димерите, образувани чрез кръстосано -свързване или не-ковалентни взаимодействия, могат да бъдат получени по различни методи и изолирани и пречистени, за да осигурят контроли с висока чистота. Димерите са трудни за пречистване, но ние имаме опит да знаем как да разделяме мономерите.

Примеси,-свързани с линкер
Линкерът (-Glu, PEG и т.н.) може да липсва или да е непълен, което води до поредица от свързани примеси. Ние можем да синтезираме различни варианти с липсващи линкери, съкратени линкери или несъответстващи линкери и да ви помогнем да изградите спектрите на такива примеси.

Дезаминирани примеси
За местата на Asn и Gln в последователността можем да приготвим контроли на дезаминирани примеси чрез принудително разграждане или целенасочен синтез. Разликата в молекулното тегло след дезаминиране е само 1, което не е лесно да се различи чрез MS, така че обикновено използваме ЯМР или специални хроматографски условия за потвърждение.

Други персонализирани примеси
Ако намерите нов неизвестен примес във вашите изследвания, ние можем да ви помогнем да анализирате структурата и да я синтезирате. Изпратете ни пробите, ние ще направим LC-MS анализ, ще изведем структурата, след това насочен синтез и след това ще сравним времето на задържане и масовия спектър, за да потвърдим съгласието. Правили сме този процес много пъти и степента на успех е доста висока.

Разработване и валидиране на аналитичен метод
При настройване на HPLC или LC-MS метод е необходим контрол на примесите за локализиране, определяне на разделянето, проверка на линейния диапазон и възстановяване. Без контрол, валидирането на метода липсва част. Много клиенти ни молят първо да направим няколко ключови примеси, за да настроим метода, и след това бавно да компенсираме останалите.

Хетерогенна масспектрометрия
Когато се декларира генерично лекарство, е необходим цялостен качествен и количествен анализ на примесите от процеса и продуктите на разграждане. Местоположението, съдържанието и структурата на всеки примес трябва да бъдат потвърдени от контролен продукт. Видяхме, че декларацията на информацията е изпратена за попълване, девет пъти от десет е примесите на това парче не разбирам.

Проучвания за стабилност
При дългосрочни{0}}тестове за стабилност и ускорени тестове е необходимо да се определи кои продукти на разграждане са доминиращи и каква е тенденцията в съдържанието. С контрола на примесите можем точно да определим количеството и да наблюдаваме. Клиент правеше стабилността на подготовката на тилпептид и откри, че пикът на разграждане нараства много бързо при ускорени условия, така че ние го анализирахме и синтезирахме от MS, за да потвърдим структурата, и след това клиентът с облекчение го докладва.

Тестване на освобождаване на партиди
След комерсиализацията всяка партида от API или формулировка трябва да бъде тествана за въпросното вещество. Контролите на примесите са основни инструменти за тестване на освобождаване.

Информация за генеричните декларации за лекарства
Изследванията на примесите са ключов раздел от информацията за подаване. Предоставянето на пълно профилиране на примеси и контролни данни значително намалява риска от издаване на преглед.

Случай 1: фармацевтична компания, тилпептидна програма за генерични лекарства
Те разработват генерична версия на тилпептид и се нуждаят от пълен набор от контроли за примеси за валидиране на метода. Персонализирахме 12 примеса за тях: 5 липсващи пептида, 2 окислени примеси, 1 димер, 2 продукта на отделяне на мастни киселини и 2 примеса, свързани с линкер-. Всеки от тях е с чистота над 95% и е придружен от MS и NMR данни. Ръководителят на проекта каза: "Примесите на тилпептида са два пъти повече от другите пептиди, но можете да направите всички от тях и данните са пълни, което ни спестява много работа." По-късно валидирането на метода им приключи успешно и сега те се подготвят за декларацията.

Случай 2: CRO компания, профилиране на примеси
Те предприеха качествен изследователски проект за тилпептид, който изискваше цялостен анализ на примесите от процеса. Изпратиха ни суровите проби от пептиди и ние извършихме LC-MS анализ, изведехме възможните структури на няколко неизвестни примеси, след това ги синтезирахме по целенасочен начин и сравнихме времената на задържане и масспектрите и потвърдихме четири нови примеси - две от тях бяха свързани с линкер-и две от тях бяха варианти на отделяне на мастни киселини. Клиентът използва тези данни, за да прецизира профилите на примесите и успешно премина одобрението на клиента.

Случай 3: Проучвания за стабилност, биотехнологична компания
Те изследваха стабилността на формулировката на тилпептид и откриха, че количеството продукт на разграждане нараства бързо при ускорени условия, но не знаеха какво е то. Ние анализирахме пробата чрез LC-MS и предположихме, че това е примес от дезаминиране на определено място на Asn, след което я синтезирахме по целенасочен начин и я потвърдихме чрез сравнение. Те установиха анализ, използвайки тази контрола и точно наблюдаваха тенденцията на продукта на разграждане. По-късно, когато подадоха доклада, тази част от данните бяха акцентирани от експертите и поради солидните данни не се стигна до обезщетение.

Tilpeptide е популярен продукт, но изследването на примесите е деликатна работа, особено продуктите за ексфолиране на мастни киселини и свързаните с линкер-примеси, с които много производители не могат да се справят. Ако правите качествени изследвания или генерична разработка на тилпептид и имате нужда от контрол на примесите, моля не се колебайте да се свържете с нас. Свършихме много работа, знаем какви са трудностите и знаем как да се справим.