Пептиди, маркирани със стабилен изотоп

Мета описание

Need stable isotope labeled peptide for mass spectrometry quantification or internal standard? Science-Peptide provides professional stable isotope labeled peptide synthesis service, ¹³C, ¹⁵N, ²H single labeled or multi-labeled, abundance >99%, purity >95%, MS валидиране с висока резолюция. Запитвания са добре дошли.

Пептиди, маркирани със стабилен изотоп: По-точно количествено определяне, по-надеждни резултати

Защо стабилни изотопно белязани пептиди?
Всеки, който се занимава с протеомика или метаболомика, знае, че вътрешният стандарт е ключът към точното количествено определяне на масовата спектрометрия. Стабилните изотопно белязани пептиди са химически идентични с естествените пептиди, но малко по-тежки и могат да бъдат разделени чрез масспектрометрия, което е златен стандарт за абсолютно количествено определяне.

Къде се използват стабилни изотопно белязани пептиди?
Абсолютно количествено определяне чрез масспектрометрия: като вътрешен стандарт за коригиране на матрични ефекти и ефективност на йонизация.
Разработване на SRM/MRM метод: установяване на количествени методи, оптимизиране на параметрите на масовата спектрометрия
Анализ на метаболитния поток: за проследяване на метаболитните пътища и изчисляване на потоците
Кинетика на протеинова хидролиза: за изследване на ефективността на ензимното разцепване
Клинична диагностика: установяване на количествени методи за маркери на заболяването.

Какво можем да направим

1. Видове изотопи, в зависимост от това, от което се нуждаете

Изотоп	Позиция за етикетиране	Увеличаване на масата	Сценарии
¹³C	Аминокиселинен гръбнак въглерод	Въз основа на броя на въглеродните атоми	Най-често използвана, значителна промяна в масовия спектър
¹⁵N	Амиден или страничноверижен азот	Всеки азот + 1	Двойно-етикетиране с ¹³C
²H (D)	Водородни атоми	+1 на деутерий	Евтин, но може да има хроматографско отместване
¹⁸O	C-краен карбокси кислород	+2	Етикетиране след разцепване, добро за триптични пептиди.

2. Метод на етикетиране, зависи от това колко грамажи са ви необходими

Тип етикетиране	Описание	Кога да използвате
Единично етикетиране	Само един изотоп е маркиран, например ¹³C	Рутинно количествено определяне,-контролирани разходи
Двойно етикетиране	По-голямо изместване на масата, напр. ¹³C+¹5N	Избягва припокриване с естествени пептидни изотопни пикове
Пълно етикетиране	Всички аминокиселини са маркирани	Изследвания на метаболитния поток, рядко
Точково етикетиране	Етикети-специфично за позиция, напр. Lys-¹³C на определена позиция	Специални нужди, изисква се дизайн

3. белязани пептиди, които можем да синтезираме
Единично-маркирани аминокиселини: напр. ¹³C6-Arg, ¹³C5-верижно-разклонени аминокиселини, ¹5N2-Lys и др.
Двойно-белязани аминокиселини: напр. ¹³C9,¹5N-Tyr, ¹³C6,¹5N4-Arg
Етикетиране с деутерий: напр. d3-Ala, d10-Leu и др.
C-терминално ¹⁸O етикетиране: етикетиране след смилане, за триптични пептиди

4. Възможност за синтез

програми	Възможност
Дължина на пептида	5-30 аминокиселини (изотопното маркиране на аминокиселини е скъпо, подходящо за къси пептиди)
Сайт за етикетиране	Могат да бъдат определени единични или множество белязани аминокиселини
изотопно изобилие	>99%
Опции за чистота	Regular purity (95-98%), high purity (>98%)
Добив на лента	0,5-10 mg (в зависимост от дължината на пептида и сложността на етикетирането)
Формат на доставка	Центрофужни епруветки, флакони
Време на цикъл	2-4 седмици (изисква се персонализирано етикетиране на аминокиселините)

5. Контрол на качеството: за потвърждаване на правилното етикетиране и чистотата на пептидите
Контролът на качеството на стабилни изотопно белязани пептиди зависи от два ключови момента: дали етикетирането е правилно или не и дали чистотата е достатъчна или не.
MS с висока разделителна способност: точно потвърждение за преброяване на масата, за да видите дали етикетирането е пълно.
HPLC: търсете чистота и също така търсете небелязани пептидни остатъци.
Аминокиселинен анализ: по избор, за потвърждаване на съотношението на белязаните аминокиселини.

Защо се нуждаете от нас, за да направим пептид за маркиране на стабилен изотоп?

1. Правим това от 20 години
Белязаният със стабилен изотоп -пептид звучи като „синтезиран с по-тежки аминокиселини“, но белязаните аминокиселини са скъпи, разнообразни и имат специални условия на реакция, така че е различен от обикновения синтез. През годините сме помагали на нашите клиенти да правят различни видове маркирани пептиди: от най-простото ¹³C единично-маркиране до сложното ¹³C+¹⁵N двойно-маркиране и от малки пептиди до пептиди със средна-дължина, натрупахме опит.

2. Разполагаме с пълна гама от етикетирани аминокиселини
¹³C етикетиране: аланин, аргинин, изолевцин, левцин, лизин, фенилаланин, пролин, треонин, тирозин, валин и т.н.
¹⁵N етикетиране: единично или двойно маркиране на ¹5N за различни аминокиселини
Етикетиране с деутерий: d3-Ala, d3-Leu, d5-Phe, d10-Leu и др.
Двойно етикетиране: ¹³C+¹5N комбинация с по-голямо изместване на масата

3. Гарантирано изобилие, без-използвани пептиди.
What is the biggest fear of stable isotope labeled peptides? Incomplete labeling, mixing with unlabeled peptides, and then the quantification will not be accurate. We use labeled amino acids with >99% изобилие, стриктно контролирайте процеса на синтез и накрая потвърдете, че няма небелязан пептиден остатък чрез MS с висока -резолюция.

4. Чистота при поискване, без загуба на пари
Конвенционална чистота (95-98%): достатъчна за разработване на количествен метод за масспектрометрия и вътрешен стандарт.
High purity (>98%): клинични диагностични стандарти, абсолютно количествено определяне, по-стабилни резултати.

5. Пълни данни, етикетирането може да бъде проследено.
Ние предоставяме MS данни с висока разделителна способност за всеки белязан пептид и точното масово число се съпоставя, за да докаже, че етикетирането е правилно.

6. По целия път от разработването на метода до клиничното изпитване.
След намирането на добър белязан пептиден вътрешен стандарт често има нужда от още-последваща работа: като усилване на синтеза, установяване на GMP версия за клинична диагностика. наука-Peptide може да бъде безпроблемен, един и същ ръководител на проекта, който да следва до края, няма нужда да повтаряте комуникацията.

Стабилни изотопно маркирани пептиди

Изследователска област	Как да използвате	Препоръчителни типове етикетиране
Протеомика	SRM/MRM Абсолютно количествено определяне	Маркировка ¹³C или ¹³C+¹5N
Метаболомика	Анализ на метаболитния поток	Напълно етикетирани или специално етикетирани
Клинична диагностика	Количествено определяне на маркера на заболяването	Висока чистота, етикетиране ¹³C
Фармакокинетика	Количествено определяне на пептидно лекарство	Маркировка ¹³C или ²H
Ензимна кинетика	Количествено определяне на продуктите на ензимно разцепване	¹⁸O етикетиране (C-терминал)

Доставка и контрол на качеството

Доставка: лиофилизиран прах, центрофужни епруветки или флакони
Придружаващи документи: COA (HPLC карта на чистотата, MS масспектрометрия с висока-резолюция), отчет за синтез (по избор)
Изследвания по избор: аминокиселинен анализ, съдържание на пептиди, ендотоксин
Персонализирано опаковане: според вашите изисквания, етикетиране и опаковане

Преди да бъде изпратен всеки белязан със стабилен изотоп пептид, ние ще прегледаме етикетирането, чистотата и молекулното тегло, за да гарантираме пълни данни и надеждно качество.

Три реални случая

Случай 1: Проект за вътрешно етикетиране на протеомична платформа.

The customer needed to establish MRM quantification methods for 10 biomarkers in plasma, and the corresponding stable isotope-labeled peptides were required as internal standards. We synthesized 10 ¹³C6-Arg-labeled peptides (each labeled with Arg at the C-terminus) with abundance >99% and purity >95%. Клиентът създаде количествен метод, използвайки тези вътрешни стандарти с линеен диапазон от 3 порядъка.

Случай 2: ФК изследователска програма на фармацевтичната компания

Клиентът разработва терапевтичен пептид и трябва да направи фармакокинетично изследване, така че трябва да синтезира изотопно-белязана версия на пептида като вътрешен стандарт. Ние синтезирахме ¹³C5,¹5N1-Val белязан пептид и въведохме белязана аминокиселина в последователността. MS с висока{6}}резолюция потвърди пълното маркиране и клиентът успешно измери концентрацията на лекарството в плазмата чрез LC-MS/MS.

Случай 3: Проект за изследване на метаболизма

За да проучи метаболизма на аминокиселините с разклонена{0}}верига, клиентът се нуждаеше от къси пептиди, маркирани с ¹³C6-Leu и ¹³C5-Val като маркери. Синтезирахме трипептиди Leu-Val-Phe, които бяха белязани с ¹³C съответно на Leu позиция и Val позиция, и успешно проследихме метаболитните потоци на тези пептиди в експерименти за клетъчно усвояване.

Какви са вашите нужди от белязан с стабилен изотоп пептид?

Независимо дали правите протеомично количествено определяне, фармакогенетични изследвания или анализ на метаболитния поток, стига да трябва да маркирате пептиден вътрешен стандарт, можете да говорите с нас.

Какво трябва да ми кажеш:
Пептидна последователност
Коя аминокиселина искате да етикетирате (позиция и тип етикетиране)
Тип изотоп (¹³C, ¹5N, ²H и др.)
Колко е необходимо (mg)
Изисквания за чистота

Да ви дадем подробна оферта и обратна връзка за осъществимост в рамките на 24 часа.